我們通過核酸檢測才能檢測出身體內(nèi)部的基因序列有沒有問題，現(xiàn)在核酸檢測的方法是pcr核酸檢測，這種方法是什么意思，主要檢測手段是什么，大概幾天出結(jié)果。

pcr核酸檢測是什么意思

PCR的意思是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，能夠用來擴增DNA，從而將微量的DNA擴增到能夠檢測的程度。有些病毒的核酸是DNA，需要采用這個方法進(jìn)行檢測。所以PCR并不是進(jìn)行的檢查，而是檢測DNA的一種方法。比如乙肝病毒DNA定量，用的就是這一種方法。檢查DNA的目的，一方面是可以診斷疾病，如果連病原體的DNA都能檢測到，就說明感染了這種病原體;另一方面是判斷病毒復(fù)制的多少，從而判斷病情嚴(yán)重程度或者治療效果。

pcr核酸檢測方法與步驟

進(jìn)行核酸檢驗，需要經(jīng)過取樣、留樣、留存、核酸提取、上機檢測五個步驟。

核酸檢測的第一步就是采集人體分泌物，用鼻試子或咽試子擦拭鼻腔或咽后壁及雙側(cè)咽扁桃體處。

第二步醫(yī)務(wù)人員進(jìn)行留樣，將試子頭浸入細(xì)胞保存液中，折斷尾部后立即旋緊管蓋。

第三部要將樣本放入密閉袋中，保存好并及時送檢。

第四步將樣本送進(jìn)實驗室，提取核酸。

第五步，將提取物進(jìn)行熒光PCR擴增反應(yīng)。

pcr核酸檢測要多久出結(jié)果

核酸檢測操作過程需要幾個小時，一般1-2天出結(jié)果。目前新冠病毒的核酸檢測主要是使用RT-PCR法檢測試劑盒，操作是：1、檢測人員先用核酸提取試劑盒提取患者標(biāo)本里的核酸。2、把提取到的核酸放進(jìn)檢測試劑中復(fù)制。3、結(jié)果判定。第1步和第2步都有嚴(yán)格的操作流程和操作條件，整體耗時在1-4小時之間，最后判定結(jié)果。醫(yī)院的檢測是上午統(tǒng)一上機，到統(tǒng)一出結(jié)果差不多5個小時，也就到了下午，然后統(tǒng)一上報，不會隨到隨檢。所以下午或晚上所送的標(biāo)本是第2天做，有的醫(yī)院自己不具備實驗室條件，不能做，需送到上一級實驗室做，保守估計時間是1-2天。

什么是實時熒光RT-PCR

所謂RT-PCR 就是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的擴增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。

① 提取病毒的RNA

先從樣本中提取出病毒的RNA。具體來說，就是在樣本中加入核酸提取試劑，把病毒破壞，讓核酸釋放出來。

② 把病毒RNA“反轉(zhuǎn)錄”成cDNA

通過反轉(zhuǎn)錄技術(shù)(RT)，把病毒的RNA“反轉(zhuǎn)”成一種特異DNA，即cDNA(因為病毒RNA結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，所以把病毒RNA轉(zhuǎn)換成穩(wěn)定的cDNA會更方便檢測)

這里會用到核酸檢測試劑盒中一種叫“反轉(zhuǎn)錄酶”的物質(zhì)。而完成轉(zhuǎn)錄后，所有工作都將圍繞cDNA展開。

③ 進(jìn)行cDNA的擴增與檢測

簡單說就是擴增cDNA的數(shù)量。這里應(yīng)用的就是PCR，全稱聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。具體來說，就是借助試劑盒中一些特殊物質(zhì)，讓cDNA不斷復(fù)制，使其數(shù)量呈指數(shù)式增長。

當(dāng)cDNA擴增的同時，試劑盒中還有一種叫熒光探針的東西同時工作。它會釋放熒光信號，cDNA每完成一次擴增，熒光信號就會增加一點，而PCR檢測儀就能記錄到一個熒光信號增加的Ct值。

④ 出結(jié)果

這一步就是根據(jù)檢測儀記錄的Ct值，進(jìn)行檢測結(jié)果分析。

理想狀態(tài)下，如果樣本中有新冠病毒，那么在cDNA完成預(yù)訂次數(shù)的擴增后，檢測儀記錄的Ct值就會形成一個逐漸上升的S形曲線，檢測結(jié)果為陽性;如果沒有類似的S型曲線，檢測結(jié)果就為陰性。

做完以上所有工作，通常需要4~6小時。